مقاله مطالعه اثر میدان مغناطیسی و سالیسی لیکاسید بر گیاه بادرنج

 

برای دریافت پروژه اینجا کلیک کنید

مقاله مطالعه اثر میدان مغناطیسی و سالیسی لیکاسید بر گیاه بادرنجبویه (نعناعیان) تحت تنش فرابنفش B تحت pdf دارای 17 صفحه می باشد و دارای تنظیمات در microsoft word می باشد و آماده پرینت یا چاپ است

فایل ورد مقاله مطالعه اثر میدان مغناطیسی و سالیسی لیکاسید بر گیاه بادرنجبویه (نعناعیان) تحت تنش فرابنفش B تحت pdf کاملا فرمت بندی و تنظیم شده در استاندارد دانشگاه و مراکز دولتی می باشد.

این پروژه توسط مرکز مرکز پروژه های دانشجویی آماده و تنظیم شده است

توجه : در صورت  مشاهده  بهم ریختگی احتمالی در متون زیر ،دلیل ان کپی کردن این مطالب از داخل فایل ورد می باشد و در فایل اصلی مقاله مطالعه اثر میدان مغناطیسی و سالیسی لیکاسید بر گیاه بادرنجبویه (نعناعیان) تحت تنش فرابنفش B تحت pdf ،به هیچ وجه بهم ریختگی وجود ندارد


بخشی از متن مقاله مطالعه اثر میدان مغناطیسی و سالیسی لیکاسید بر گیاه بادرنجبویه (نعناعیان) تحت تنش فرابنفش B تحت pdf :

مقدمه

امروزه فعالیتهای صنعتی بشر باعث افزایش ترکیبات آلوده-کننده اتمسفر بهخصوص ترکیبات هالوژندار شده است که این ترکیبات به دلیل پایداری زیاد به سطح استراتوسفر میرسند و باعث تخریب لایه اوزون میشوند. کاهش لایه اوزون باعث افزایش میزان پرتوهای فرابنفش در سطح زمین شدهاست و مشکلاتی را برای موجودات زنده به وجود آورده است .(Buchholz et al., 1995) درمیان موجودات زنده، گیاهان به دلیل احتیاج اجتنابناپذیرشان به نور برای انجام فتوسنتز، بیشتر تحت تأثیر پرتوهای فرابنفش قرار میگیرند و آسیبپذیرتر هستند .(Booji-James et al., 2000) اشعه UV موجب تغییر در مورفولوژی گیاهان میشود که شامل تغییر در شکل برگ، افزایش شاخههای جانبی، کاهش میانگرهها، کاهش سطح برگ، کاهش بسامد روزنهای و کاهش ارتفاع گیاه است .(Horii et al., 2007) به دلیل جذب اشعه UV توسط اسیدهای آمینه حلقوی مانند فنیلآلانین و تیروزین، پروتئینها نسبت به UV بهخصوص UV-B جذب بالایی نشان میدهند .(Hollosy, 2002) پاسخ گیاهان به اشعه UV به گونه گیاهی، رقم کشاورزی، مراحل رشد و نمو، وضعیت رشد و میزان نور UV بستگی دارد .(Qin et al., 2004) ازطرف دیگر، فسفولیپیدها و گلیکولیپیدها از اجزای اصلی غشاهای سلولهای گیاهی هستند که اسیدهای چرب غیراشباع دارند و در حضور اکسیژن و UV تخریب میشوند (Rhybus-Zajac &

.Kubis., 2010)

پراکسیداسیون لیپیدها هم جزء آسیبهای اکسیداتیو است که از محصولات این عمل میتوان به MDA (مالون دیآلدئید) و پراکسیدهیدروژن اشاره کرد .(Holzinger & Lutz., 2006) پرتو فرابنفش باعث کاهش مقدار کلروفیل a، کلروفیل b و نیز کاروتنوئیدها میشود. کاهش مقدار کلروفیل میتواند به دلیل تأثیر این اشعه بر پیشسازهای سنتز کلروفیل یا تخریب کلروفیل موجود باشد. کاهش کاروتنوئیدها میتواند بهعلت تبدیل آن به آبسیزیک اسید باشد که عموماً در استرسهای محیطی مقدار
آبسیزیک اسید افزایش مییابد (Mahdavian et al., .2008) سالیسیلیک اسید تنظیم کننده رشد درونی از گروه

41/41 Nova Biologica Reperta 1 (2): 40-56 (2015)

ترکیبات فنولی طبیعی است که در تنظیم فرآیندهای فیزیولوژیکی گیاه نقش مهمی دارد. القای گلدهی، رشد و نمو، سنتز اتیلن، تأثیر در باز و بسته شدنروزنهها، تنفس، جذب یون، تکامل گیاه، فتوسنتز و جوانهزنی از نقشهای مهم سالیسیلیک اسید به شمار میرود .(El-Tayeb et al., 2006) سالیسیلیک اسید همچنین باعث فعالشدن سیستم مقاومت اکتسابی سیستمیک، سنتز متابولیتها و آنزیمهای آنتیاکسیدان میشود .(Eraslan et al., 2008) گزارش شده است که سالیسیلیک اسید در تنظیم و ایجاد علامتهایی برای بیان ژنها در زمان پیری در گیاه آرابیدوپسیس دخالت دارد (Morris et al., .2000) سالیسیلیک اسید در گیاهانی که درمعرض تنشهای محیطی ازقبیل شوری، خشکی، فلزات سنگین، گرمازدگی و سرمازدگی هستند نقش حفاظتی دارد (Chakraboyty &

.Tongden, 2005)

تغییرات ایجاد شده در طبیعت در اثر دخالتهای انسان در خاک، آب و هوا به دلیل استفاده از مواد شیمیایی مختلف برای افزایش بهرهوری گیاهان به جستجو جهت پیدا کردن روش-های جدید منجر شده است. بنابراین جایگزینی کودها و مکمل-های شیمیایی با تیمارهای فیزیکی ازقبیل میدان مغناطیسی، میزان سموم را در مواد خام گیاهی کاهش میدهد و باعث افزایش سلامت غذایی و محیط زیست میشود (Balouchi & .Sanavy, 2009) بررسی تأثیر میدانهای مغناطیسی بر باقلای مصری سفید و تربچه نشان داده است که میدانهای مغناطیسی، جوانهزنی را در باقلای مصری سفید و تربچه تحریک میکند و تأثیری مثبت بر توسعه گیاه و تولید سالانه بذر دارد و محصول سالانه را افزایش میدهد .(Podleoeny et al., 2005) همچنین نشان داده شده است که میدان مغناطیسی موجب افزایش جوانهزنی، وزن تر و طول ساقه در گیاه آفتابگردان می-شود و تأثیر مثبتی بر شاخصهای بنیه بذر دارد (Vashisth &

.Nagarajan, 2010)

بادرنجبویه با نام علمی Melissa officinalis L. گیاهی از تیره نعناعیان و از گیاهان دارویی است که از مهم ترین خواص دارویی آن میتوان به آرامبخشی، تقویت اعصاب، ضدنفخ و تقویتکننده حافظه اشاره کرد .(Kennedy et al., 2006) این گیاه در ارومیه برای استفاده از عرق آن به عنوان شربت و

یافتههای نوین در علوم زیستی جلد 1، شماره 42/42 Nova Biologica Reperta 1 (2): 40-56 (2015) 40- 56 :2

اسانس در تولید شیرینیجات در حد وسیعی کشت میشود. تا-کنون تحقیقاتی در زمینه اثر میدانهای مغناطیسی به همراه برخی تنشهای محیطی مثل UV انجام نگرفته است، بنابراین هدف این مطالعه بررسی تأثیر پرتوهای UV-B و نقش سالیسیلیک اسید بهعنوان یک ماده شیمیایی و میدان مغناطیسی به مثابه روش فیزیکی در تخفیف آثار زیانبار این پرتوها بر شاخصهای رشدی، فیزیولوژیکی و بیوشیمیایی گیاهان بادرنجبویه (ملیسا اوفیسینالیس) بود.

مواد و روشها

مواد گیاهی و وضعیت رشد

ابتدا خاک و ماسه مورد استفاده جهت کشت در اتوکلاو و در دمای 121 درجه سانتیگراد و فشار یک اتمسفر به مدت 5 ساعت استریل شدند. خاک و ماسه به نسبت 1 به 4 باهم مخلوط شدند. بذرهای سالم و یکنواخت بادرنجبویه به مدت 15 دقیقه در محلول 10 درصد هیپوکلریت سدیم استریل و سپس با آب مقطر کاملاً شستوشو داده شد و نصف بذرها برای جوانهزنی در داخل پتریدیش قرار گرفتند؛ نصف دیگر پساز ضدعفونی با هیپوکلریت 5 درصد و شستشو با آب به مدت صفر و 60 دقیقه درمعرض میدانهای مغناطیسی با شدت صفر، 40 و 85

میلیتسلا در آزمایشگاه ابر رسانایی قرار گرفتند. جهت اعمال تیمار از تولیدکننده میدان مغناطیسی ساخت ایران با قدرت تولید میدان مغناطیسی تا 2 تسلا، برای ایجاد شدت میدان ذکرشده از منبع تغذیه AP 10090 ساخت انگلیس و برای سنجش میدان مغناطیسی ایجادشده از دستگاه تسلامتر مدل فیو ساخت آلمان با قدرت اندازهگیری 20 تا 200 میلیتسلا استفاده شد. سه گروه 20 تایی از بذرها (بدون تیمار میدان مغناطیسی و با تیمار میدان-های مغناطیسی 40 و 85 میلیتسلا) به صورت جداگانه درون ظروف پتریدیش به قطر 11 سانتیمتر که حاوی کاغذ صافی واتمن شماره 1 و آب مقطر بود انتقال یافتند. پساز جوانهزنی 4 دانه رست یکدست و همسان به هر گلدان انتقال یافتند و در فضای گلخانه با دمای حدود 28±2 درجه سانتیگراد و در شدت نور 5000 لوکس معادل 150 EmM-2s-1 با فتوپریودی

به مدت 16 ساعت روشنایی و 8 ساعت تاریکی پرورش یافتند. گیاهان کشتشده با محلول هوگلند تغذیه شدند. یک هفته پساز کشت گلدانهای تیماردیده دوباره به مدت 1 ساعت در-معرض میدانهای مغناطیسی با شدتهای پیشگفته قرار گرفتند. سپس نصف گلدانهای تیماردیده و نصف گلدانهای بدون تیمار در یک ماه و به صورت یکروز در میان و هربار به مدت 15 دقیقه درمعرض پرتوهای UV-B قرار گرفتند. اشعه لازم برای تیمار UV-B توسط دو لامپ 15 وات تأمین شد.

بعد از مرحله ششبرگی، اسید سالیسیلیک با غلظت یـک میلـی-مولار به مدت یکهفته و هر روز روی برگ گیاهان پاشیده شد.
آزمایش به صورت طـرح کـاملاً تصـادفی بـا 8 تیمـار و 6 تکـرار برای هر تیمار انجـام گرفـت. تیمارهـا عبـارت بودنـد از: گیاهـان شاهد، گیاهان تحت تیمار میدان مغناطیسی 40 میلیتسلا، گیاهان تحــت تیمــار میــدان مغناطیســی 85 میلــیتســلا، گیاهــان شــاهد + محلول 1mM سالیسیلیک اسید، گیاهان در معـرض اشـعه UV-B، گیاهـــان در معـــرض تـــابش فـــرابنفش + B محلـــول 1mM سالیسیلیک اسید، گیاهان در معـرض تـابش فـرابنفش+ B میـدان مغناطیسی 40 میلیتسلا و گیاهان در معرض تابش فرابنفش + B میدان مغناطیسی 85 میلیتسلا. پساز گذشـت 40 روز نمونـه هـا برداشت شده و سه تکـرار از هـر کـدام بعـد از جداسـازی انـدام هوایی از ریشهها در داخل پاکتهای مجزا قرار داده شد و بـرای تعیین وزن خشک به مدت 72 ساعت در آون 85 درجـه سـانتی-گراد قرار گرفتنـد؛ سـپس وزن خشـک انـدام هـوایی و ریشـههـا بوسیله ترازویی با حساسیت 0/0001 گرم انـدازهگیـری شـد. سـه تکــرار دیگــر از هــر تیمــار بــرای تحلیــلهــای بیوشــیمیایی و فیزیولوژیک که به وزن تر نیاز داشـتند، بعـد از جداسـازی انـدام هوایی و ریشهها و توزین آنها بـه فریـرز -80 درجـه سـانتیگـراد منتقل شدند.

یافتههای نوین در علوم زیستی جلد 1، شماره 40- 56 :2

مطالعه پارامترهای فیزیولوژیکی

اندازهگیری رنگیزههای کلروفیل و کاروتنوئید

میــزان کلروفیــل (Chla) a، (Chlb) b و کاروتنوئیــدهای کــل (Cx+c) با روش لیختنتالر و ولبورن اندازهگیری شـد. یـک گـرم از بافت تر برگ توزین و با 30 میلیلیتر استون 80 درصد له شـد. بعد از صافکردن، عصاره به مدت 10 دقیقه بـا دور 2500 rpm سانتریفوژ شد. برای تعیین میزان کلروفیل a و b جذب آن توسط دستگاه اسپکتروفتومتر در طول مـوج 663 و645 نـانومتر و بـرای تعیین میزان کاروتنوئیدها در طول موج 470 نانومتر اندازهگیـری شد. برای محاسبه مقادیر کلروفیل a و b و کاروتنوئید از فرمـول لیختنتالر و ولبورن به شرح زیر استفاده شد:

Chla= (11.75 A663 – 2350 A645)

Chlb= (18.61 A645 – 3960 A663)

Cx+c= (1000A470 – 2270 Chl a – 814 Chlb ) /227

A میزان جذب خوانده شده هر طول موج توسط اسـپکتروفتومتر است.

اندازهگیری میزان قندهای محلول

برای اندازهگیری میزان قندهای محلول از روش فنل سولفوریک کـوچرت اســتفاده شــد .(Kennedy, 2004) ابتــدا 0/01 گــرم ماده خشک گیاهی در داخل هاونچینی که محتوی 10 میلیلیتـر آب مقطر بود ساییده شد. عصاره حاصل در لولههـای سـانتریفوژ ریخته شد و به مدت 10 دقیقه با دور 6000g سـانتریفوژ گردیـد. روی 0/5 میلیلیتر از محلول رویی، آب مقطر اضافه شد و حجم آن بـه 2 میلـیلیتـر رســانده شـد. سـپس بـه هــریـک از لولـههــای آزمایش، 1 میلیلیتر فنل 5 درصد اضافه کردیم و بعد از ده دقیقه 5 میلیلیتر اسید سولفوریک غلیظ روی هرکدام اضافه شـد. بعـد از نیمساعت میزان جذب در طول مـوج 485 نـانومتر بـا دسـتگاه اســپکتروفتومتر انــدازه گیــری شــد. غلظــت قنــدهای محلــول بــا استفاده از منحنی استاندارد تعیین شد.

43/43 Nova Biologica Reperta 1 (2): 40-56 (2015)

اندازهگیری میزان پروتئین کل

برای اندازهگیری میزان پروتئینها از روش فـولن لـوری اسـتفاده شد .(Lowry et al., 1951) بدینترتیب کـه 0/01 گـرم مـاده خشک گیـاهی در داخـل هـاون چینـی کـه محتـوی 5 میلـیلیتـر محلول تریساسید کلریدریک بود ساییده شد. سپس عصارههای گیاهی ساییده شده هر تیمـار، جداگانـه در لولـههـای سـانتریفوژ ریخته شد و به مدت ده دقیقه با دور 4000g سانتریفوژ شـدند. 1 میلیلیتر از محلول بالایی هر نمونه در لولههای آزمایش جداگانه ریخته شد و روی هرکدام 4 میلـیلیتـر از محلـول C اضـافه شـد. محلول C بهترتیب زیر تهیه شد:

محلول 4 :A گرم کربنات کلسیم، 0/4 گرم هیدروکسید سـدیم، 0/2گرم سدیم پتاسیم تارتارات کـه مجموعـاً در 100 میلـیلیتـر آب مقطر حل شد

محلول :B حاوی سولفات مس 0/5 درصد (W/V)

محلول 50 :C میلیلیتر محلول 1 + A میلیلیتر محلول B

بعد از 10 دقیقه، 1/5 میلیلیتـر محلـول فـولن رقیـقشـده بـا آب مقطر (9:1) بـه نمونـههـا اضـافه شـده و بـه مـدت نـیم سـاعت در تاریکی قرار گرفتند. درنهایت جذب نـوری آنهـا در طـول مـوج 660 نــانومتر بــا دســتگاه اســپکتروفتومتر مــدل بیوویــو اس 2100 خوانــدهشــده و بــا اســتفاده از منحنــی اســتاندارد پــروتئین، میــزان پروتئین نمونهها برحسب میلیگرم بر گـرم وزن خشـک محاسـبه شد.

اندازهگیری فعالیت آنزیم فنیلآلانینآمونیالیاز

برای اندازهگیری فعالیـت آنـزیم فنیـلآلانـینآمونیالیـاز از روش بئودیون ایگان و تورپ استفاده شد (Beaudion –Eagan & .Thorpe, 1989) مخلوط واکنش شامل بافرتریس 0/5 میلـی-مولار با pH= 8 و فنیلآلانین 6 میکرومولار بود. 200 میکرولیتـر عصاره آنزیمی به هر مخلوط واکنش افزوده شـد و بـه مـدت 60 دقیقه در 37 درجه سـانتیگـراد قـرار گرفـت و بعـد از 60 دقیقـه واکنش با افزودن 50 میکرولیتر HCl نرمال متوقف شد و سـپس جذب نمونههـا در 290 نـانومتر بـا دسـتگاه اسـپکتروفتومتر مـدل

یافتههای نوین در علوم زیستی جلد 1، شماره 44/44 Nova Biologica Reperta 1 (2): 40-56 (2015) 40- 56 :2

بیوویو اس2100 اندازهگیری شد. برای رسم منحنی اسـتاندارد از اسید سینامیک بهعنوان استاندارد استفاده شد و درنهایت فعالیـت آنزیم فنیلآلانینآمونیالیاز برحسب میکروگرم سینامات تولیـدی به ازای هر میکروگرم پروتئین برای هریـک از نمونـههـا محاسـبه شد.

اندازهگیری میزان فلاونوئیدها

برای اندازهگیری فلاونوئیـدها از روش جیـا و همکـاران اسـتفاده شـد(.(Jia et al., 1999 یـکدهـم گـرم از وزن تـر بـرگ در هاون چینی که حاوی 10 میلیلیتر متانول بود سائیده شـد. سـپس روی 1 میلیلیتر از عصاره استخراجشـده، 1 میلـیلیتـر محلـول 2 درصدآلومینیوم تریکلراید (AlCl) اضافه شـد و حجـم آن بـا اتانول به 25 میلیلیتر رسید. نمونـههـا بـه مـدت 10 دقیقـه در دور 3000g سانتریفوژ شدند و بعد از 40 دقیقه جـذب نمونـههـا (فـاز بالایی نمونههای سانتریفوژشده) در طول مـوجهـای 330 نـانومتر با دستگاه اسپکتروفتومتر مدل بیوویو اس 2100 اندازهگیری شد. بــرای محاســبه غلظــت فلاونوئیــدهای کــل از ضــریب خاموشــی mMcm-1 33000 استفاده شد.

اندازهگیری آنتوسیانین

بــرای انــدازهگیــری آنتوســیانین از روش ونگــر اســتفاده شــد .(Wanger, 1979) یکدهم گرم وزن تر برگ در هاون چینـی حاوی 10 میلیلیتر متانول اسیدی 99) درصد متـانول و 1 درصـد اسید کلریدریک) ساییده شد. عصاره حاصل به مـدت 10 دقیقـه با دور 6000 g سانتریفوژ شد و فاز بالایی آن به مدت 24 ساعت در دمای آزمایشگاه و در تاریکی قرار گرفت. جذب هـریـک از نمونهها در طول مـوج 550 نـانومتر بـا دستــــگاه اسـپکتروفتومتر خوانــده شــد. بــرای محــــــاسبه غلظــت آنتــــوسیانین از ضــریب خاموشی150 mM cm ¹ استفاده شد.

برنامههای آماری

بــرای تحلیــل دادههــا و رســم نمودارهــا از برنامــههــای رایانــهای SPSS و EXCELL استفاده گردید. در کلیه نمودارها نتایج بـه صورت مقادیر میانگین سـه تکـرار بیـان شـد و بارهـای عمـودی نشاندهنده ±SE برای سه تکرار است. اخـتلاف بـین تیمارهـا بـا استفاده از تحلیل واریانس آنووای دوطرفه در سطح آماری p 005 انجام شد.

نتایج

شاخصهای رشدی

براساس نتایج بهدستآمده طول ریشه و سـاقه تحـت تـأثیر پرتـو UV-B کاهش معنیداری نسبت به شاهد پیـدا کـرد (شـکل .(1 سالیسیلیک اسید بـهتنهـایی موجـب افـزایش طـول ریشـه و سـاقه نسبت به شاهد شد. همچنین در نمونههایی که پرتوهای فـرابنفش به همراه سالیسیلیک اسید تیمار شده بودند کاهش طول نسبت به تیمار پرتوهای فرابنفش بدون سالیسـیلیک اسـید بـه طـور معنـی-داری کمتر بود (شـکل .(1 پـیشتیمـار میـدان مغناطیسـی باعـث افزایش طول ساقه و ریشه دانهرستها نسبت به گیاهان شاهد شد که این افزایش در هر دو شدت میدان مغناطیسی نسبت بـه شـاهد معنیدار بود. تیمار همزمان با میدانهای مغناطیسی و پرتـو UV-B با افزایش معنیدار رشد طولی ریشـه و سـاقه نسـبت بـه تیمـار UV-B همراه بود و میدان مغناطیسی توانسـت در هـر دو شـدت در ریشه و در شدت 85 میلیتسلا در ساقه اثر کاهشی UV-B را کاملاً جبران کند.

وزن تر و خشک

اندازهگیری وزن تر و وزن خشک گیاهان پرتودیده و مقایسه آن با گیاهان شاهد نشان داد که اعمـال پرتـو UV-B باعـث کـاهش معنیدار وزن تر و خشک در سـطح احتمـال 5 درصـد نسـبت بـه گیاهان شاهد شد (شکل .(2

یافتههای نوین در علوم زیستی جلد 1، شماره 49 45/45 Nova Biologica Reperta 1 (2): 40-56 (2015) 40- 56 :2

A
a UV 0 15

b c b c طول
d de 12
e
ساقه
9
سانتی(
6
)متر
3

0

mT 85 SA Control mT 40

a UV a 0

b
c c c c
d

AS Control mT 40 mT 85

B

15
12 طول

9 ریشه
)مترسانتی(
3
6
0

شکل -1 تأثیر سالیسیلیک اسید 1) میلیمولار) و میدان مغناطیسی 40) و 85 میلیتسلا) روی طول ساقه (A) و ریشه (B) در گیاه بادرنجبویـه تحـت تـنش پرتـو .UV-B در هر ستون، میانگینهای دارای حروف متفاوت تفاوت معنیداری با استفاده از آزمون دانکن دارند.

Fig. 1. Effect of salicylic acid (1 mM) and magnetic field ( 40 and 85 mT) on shoot (A) and root length (B) in Melisa officinalis under UV-B stress. Different letters in each column show significant difference at p <0.05 by Duncan’s

Test.

در نمونههای تیماریافتـه بـا پرتوهـای UV بـه همـراه سالیسـیلیک اسید مقدار این کاهش نسـبت بـه گیاهـان پرتـودیـده کمتـر بـود. پیشتیمار میدان مغناطیسی در هر دو شدت موجب افـزایش وزن تــر و خشــک نســبت بــه تیمــار شــاهد شــد. اعمــال تــوأم میــدان مغناطیسی و پرتو فرابنفش B در هر دو شدت در وزن تر توانست اثر تخریبـی پرتـو فـرابنفش را در حـد تیمـار شـاهد بهبـود دهـد. اعمال توأم میدان مغناطیسی و پرتو فرابنفش B در هـر دو شـدت توانست وزن خشک را به طور معنـیداری نسـبت بـه اعمـال بـه-تنهایی پرتو فرابنفش افزایش دهد، ولی این تیمار نسبت بـه تیمـار شاهد کاهش معنیداری نشان داد.

رنگیزههای فتوسنتزی

براساس نتایج بدست آمده میزان کلروفیل a (شکل 3 الـف) و b (شکل 3 ب) تحت تـأثیر پرتوهـای UV-B کـاهش معنـیداری

نسبت به گیاهان شاهد یافت. اما در نمونههایی که بـا سالیسـیلیک اسید تیمار شده بودنـد میـزان هـردو کلروفیـل نسـبت بـه گیاهـان شاهد افزایش معنیداری نشان داد. در تیمار توأم پرتوهـای UV-B با سالیسیلیک اسید میزان کلروفیـل a و کلروفیـل b نسـبت بـه اعمال به تنهایی هر دو پرتـو فـرابنفش افـزایش معنـیداری نشـان داد. اعمال میـدان مغناطیسـی در هـر دو شـدت موجـب افـزایش معنیدار کلروفیل a و b نسبت به گیاهان شاهد شد. اعمـال تـوأم میدان مغناطیسی با پرتو فـرابنفش در مقایسـه بـا اعمـال بـهتنهـایی پرتو فرابنفش نیز افزایش معنیدار نشان داد و همانطـوریکـه در شکل 3 مشـاهده مـیشـود، در گیاهـان تحـت تـنش UV اعمـال میدان مغناطیسی در هر دو شدت میـزان کلروفیـل را توانسـت در حد گیاهان شاهد، افزایش دهد، ولی ایـن افـزایش در مقایسـه بـا اعمال توأم سالیسیلیک اسید معنیدار نبود.

یافتههای نوین در علوم زیستی جلد 1، شماره 46/46 Nova Biologica Reperta 1 (2): 40-56 (2015) 40- 56 :2

A B

شکل -2 تأثیر سالیسیلیک اسید 1) میلیمولار) و میدان مغناطیسی 40) و 85 میلیتسلا) روی وزن تر (A) و خشک (B) در گیـاه بادرنجبویـه تحـت تـنش پرتـو .UV-B در هر ستون، میانگینهای دارای حروف متفاوت دارای تفاوت معنیدار با استفاده از آزمون دانکن هستند.

 

اشتراک‌گذاری:

 

 

 

 

 

برای دریافت پروژه اینجا کلیک کنید

کلمات کلیدی :

مقاله انتخاب سطح مقطع مناسب تونل های شهری با توجه به نشست سازه ه

 

برای دریافت پروژه اینجا کلیک کنید

مقاله انتخاب سطح مقطع مناسب تونل های شهری با توجه به نشست سازه های مجاور تحت pdf دارای 8 صفحه می باشد و دارای تنظیمات در microsoft word می باشد و آماده پرینت یا چاپ است

فایل ورد مقاله انتخاب سطح مقطع مناسب تونل های شهری با توجه به نشست سازه های مجاور تحت pdf کاملا فرمت بندی و تنظیم شده در استاندارد دانشگاه و مراکز دولتی می باشد.

این پروژه توسط مرکز مرکز پروژه های دانشجویی آماده و تنظیم شده است

توجه : در صورت  مشاهده  بهم ریختگی احتمالی در متون زیر ،دلیل ان کپی کردن این مطالب از داخل فایل ورد می باشد و در فایل اصلی مقاله انتخاب سطح مقطع مناسب تونل های شهری با توجه به نشست سازه های مجاور تحت pdf ،به هیچ وجه بهم ریختگی وجود ندارد


بخشی از متن مقاله انتخاب سطح مقطع مناسب تونل های شهری با توجه به نشست سازه های مجاور تحت pdf :

سال انتشار: 1388

محل انتشار: ششمین همایش زمین شناسی مهندسی و محیط زیست ایران

تعداد صفحات: 8

چکیده:

مقاله حاضر به انتخاب سطح مقطع مناسب تونل های مترو به عنوان تونل های متداول شهری، با توجه به نشست حاصل ازتونل سازی در زیر سازه های مجاور تونل پرداخته است. یکی از مباحث مهمی که در طراحی تون لهای مترو باید از همان ابتدا تعیین تکلیف شود، انتخاب سطح مقطع مناسب برای آنها می باشد، چونکه سطح مقطع تونل یکی از پارامترهای کنترل کننده نشست سطح زمین بوده و این مساله در محیط های شهری اهمیت بسزایی دارد، لذا در این تحقیق ضمن معرفی دو سطح مقطع مرسوم برای تونل های مترو، تاثیر نشست ناشی از اجرای آنها بر ساختمان های مجاور نیز بررسی شده است . منحنی نشست حاصل از این دو نوع روش اجرا با استفاده از روش های تجربی و عدد برای خط دو متروی تبریز رسم گردیده و با توجه به مسیر این خط، این دو روش اجرا با هم مقایسه شده است. در نهایت با توجه به نشست حاصل از اجرای تونل و موقعیت سازه های مجاور نسبت به محور تونل، روش اجرای تونل تکی برای خط دو متروی تبریز انتخاب گردیده است.

 

برای دریافت پروژه اینجا کلیک کنید

کلمات کلیدی :

مقاله آنالیز کمی برخی از متابولیت های اولیه و ثانویه فنل کل در گ

 

برای دریافت پروژه اینجا کلیک کنید

مقاله آنالیز کمی برخی از متابولیت های اولیه و ثانویه فنل کل در گیاهان داروییUrtica dioica و Glycyrrhiza glabra تحت pdf دارای 7 صفحه می باشد و دارای تنظیمات در microsoft word می باشد و آماده پرینت یا چاپ است

فایل ورد مقاله آنالیز کمی برخی از متابولیت های اولیه و ثانویه فنل کل در گیاهان داروییUrtica dioica و Glycyrrhiza glabra تحت pdf کاملا فرمت بندی و تنظیم شده در استاندارد دانشگاه و مراکز دولتی می باشد.

این پروژه توسط مرکز مرکز پروژه های دانشجویی آماده و تنظیم شده است

توجه : در صورت  مشاهده  بهم ریختگی احتمالی در متون زیر ،دلیل ان کپی کردن این مطالب از داخل فایل ورد می باشد و در فایل اصلی مقاله آنالیز کمی برخی از متابولیت های اولیه و ثانویه فنل کل در گیاهان داروییUrtica dioica و Glycyrrhiza glabra تحت pdf ،به هیچ وجه بهم ریختگی وجود ندارد


بخشی از متن مقاله آنالیز کمی برخی از متابولیت های اولیه و ثانویه فنل کل در گیاهان داروییUrtica dioica و Glycyrrhiza glabra تحت pdf :

سال انتشار: 1393
محل انتشار: دومین همایش ملی کشاورزی و منابع طبیعی پایدار
تعداد صفحات: 7
چکیده:
آزمایشی به منظور آنالیز برخی از متابولیت های اولیه نظیر کربوهیدرات کل، نشاسته، پرولین، قندهای احیاء شده و ثانویه فنل کلUrtica dioica وGlycyrrhiza glabraدرسه تکرار انجام شد. نتایج تجزیه واریانس بیانگراختلاف معنی دار دو گیاه از لحاظ میزان کربوهیدرات کل و نشاسته در سطح 5 درصد بود. در حالی که این گیاهان از لحاظ میزان پرولین، قندهای احیا شده و فنل کل اختلاف معنی داری نشان ندادند. در این مطالعهG.glabra و U. dioicaبه ترتیب دارای بیشترین و کمترین مقدار نشاسته و کربوهیدرات کل بودند. از لحاظ سایر صفات تفاوت معنی داری مشاهدهنشد

 

برای دریافت پروژه اینجا کلیک کنید

کلمات کلیدی :

مقاله بررسی تنوع زیستی باکتریهای نمک دوست نسبی و تحمل کننده نمک

 

برای دریافت پروژه اینجا کلیک کنید

مقاله بررسی تنوع زیستی باکتریهای نمک دوست نسبی و تحمل کننده نمک قابل کشت در تالاب پرشور اینچه برون تحت pdf دارای 13 صفحه می باشد و دارای تنظیمات در microsoft word می باشد و آماده پرینت یا چاپ است

فایل ورد مقاله بررسی تنوع زیستی باکتریهای نمک دوست نسبی و تحمل کننده نمک قابل کشت در تالاب پرشور اینچه برون تحت pdf کاملا فرمت بندی و تنظیم شده در استاندارد دانشگاه و مراکز دولتی می باشد.

این پروژه توسط مرکز مرکز پروژه های دانشجویی آماده و تنظیم شده است

توجه : در صورت  مشاهده  بهم ریختگی احتمالی در متون زیر ،دلیل ان کپی کردن این مطالب از داخل فایل ورد می باشد و در فایل اصلی مقاله بررسی تنوع زیستی باکتریهای نمک دوست نسبی و تحمل کننده نمک قابل کشت در تالاب پرشور اینچه برون تحت pdf ،به هیچ وجه بهم ریختگی وجود ندارد


بخشی از متن مقاله بررسی تنوع زیستی باکتریهای نمک دوست نسبی و تحمل کننده نمک قابل کشت در تالاب پرشور اینچه برون تحت pdf :

برای تضمین تولید مواد غذایی و دارویی در آینده و توسعه کشاورزی و صنعت، حفظ ذخایر توارثی موجود در طبیعت بکر و دست نخورده، امری ضروری است. بی شک تاریخچه تکامل طولانی میکروارگانیسم ها و تواناییهای متابولیکی گسترده شان و نقش مهمی که در چرخه عناصر، پالایش زیستی، تولید آنتی بیوتیک ،تولید فرآورده های تخمیری و خوراکی، همزیستی با گیاهان، بیابان زدایی و افزایش حاصلخیزی خاک و;. ایفاء می کنند، اصلی ترین دلایل اهمیت بررسی تنوع زیستی میکربی بوده است(.(28 امروزه یکی از شاخصهای سلامت هر زیستبوم و پایداری آن، تنوع میکروارگانیسمهای آن در نظر گرفته می شود. بهطوری که زیستبومهای با تنوع

کمتر، محیطهایی در معرض خطر، حساس و نیازمند مراقبت خاص محسوب میشوند. رفتارهای انسانی و یا عوامل طبیعی که زیستبومها را به سوی کاهش تنوع میکربی آن هدایت میکنند، می توانند منجر به تخریب زیستبوم و یا بروز همهگیریها و آفتها شوند 2) و .(17

یکی از چالشهای عمده در تعیین تنوع زیستی میکروارگانیسمها، مشکل جداسازی آنهاست . رایجترین روش برای شناسایی انواع میکروارگانیسمها، تهیه کشت از نمونه خاک، آب، رسوب و رشد روی محیط جامد حاوی ترکیبات مغذی است که انواع مختلفی از میکروارگانیسمها روی آن قادر به رشد هستند. در طول سالهای اخیر، بررسی

44

مجله پژوهشهای سلولی و مولکولی (مجله زیست شناسی ایران) جلد 27، شماره 1، 1393

تنوع زیستی پروکاریوتها با روشهای مولکولی، بیشتر بر اساس تکثیر ژن 16S rRNA و تعیین توالی ژنی سویهها انجام شده است (5 آنچه که روشهای وابسته به کشت از جامعه میکربی نشان میدهند بخش بسیار کوچکی از جامعه میکربی است که توان سازگاری بیشتری با شرایط کشت مصنوعی داشته اند که نمی توان آنها را نمونه شاخصی از وضعیت کلی دانست اما توسعه روشهای کشت به خصوص جایی که گروههای جدید میکربی مدنظر هستند به همراهی روشهای مولکولی ضروری است 2) و .(29

در زیست محیطهای آب و خاک ، فاکتور شوری تعیین کننده جمعیتهای میکربی محسوب می شود. خاکهای دارای بیش از 0/2 درصد نمک محلول، خاک شور نامیده می شود که در سراسر جهان و به ویژه در مناطق خشک فراوان وجود دارد .(2) اقیانوسها، دریاها، دریاچه های شور و مردابهای نمک از جمله محیطهای آبی شور شناخته شده اند. دریاچه های با میزان نمک بالا ی 0/3 درصد جزء دریاچه های شورمحسوب می شود. آبهای پرشور، تراکم نمک بسیار بالاتری نسبت به آب دریا دارند تنوع موجودات نمک دوست وتحمل کننده نمک در اکوسیستمهای آبی و خاکهای شور بسیار گسترده بوده و مجموعه ای از موجودات ماکروسکوپی ومیکروسکوپی را در برمی گیرد 2) و .(22 امروزه مطالعه بر روی میکروارگانیسم های نمک دوست به دلیل تواناییهای ویژه ای که در تحمل شرایط دشوار، تولید انواع متابولیت ها، تجزیه ماکرومولکول های گوناگون و پالایش زیستی دارند در جنبه های مختلف فیزیولوژی، اکولوژی، ژنتیک و بیوتکنولوژی توسعه یافته است .(5)

از بررسیهای انجام گرفته بر روی مناطق پرشور ایران می توان به بررسی تنوع زیستی میکروارگانیسمهای نمک دوست قابل کشت و غیر قابل کشت سواحل غربی در یاچه ارومیه (9) و تولید آنزیمهای هیدرولیتیک در باکتریهای نمک دوست این دریاچه اشاره کرد .(7)

همچنین دریاچه فصلی حوض سلطان (6)، دریاچه نمک آران و بیدگل 1)، 2و(5 و دریاچه بختگان واقع در غرب نی ریز (4) نیز از نظر تنوع میکروارگانیسمهای نمک دوست وتحمل کننده نمک و تولید آنزیمهای هیدرولیتیک بررسی شده اند.

از مطالعاتی که بر روی تحمل پذیری و مقاومت هالوفیلها نسبت به ترکیبات سمی انجام گرفته می توان به بررسی مقاومت به اکسی آنیونهای سمی تلوریت ، سلنیت ، سلنات ، ارسنات و کرومات در باسیلوس های هالوفیل بومی ایران

(8) بررسی احیاء کروم شش ظرفیتی توسط باکتری هالوفیل نسبی مقاوم به کروم Nesterenkonia sp. strain (10) MF2 و بررسی اثر اکسی آنیونهای مختلف بر مقاومت به تلوریت در باکتریهای نمک دوست :
Halomonas elongate، Halomonas maura ، Halobacillus litoralis Virgibacillus salexigenes ، Halobacillus karajensis ، Halobacillus halophillus

، Bacillus halophillus ، Salinococcus iranensis ، Salinivibrio proteolyticus اشاره کرد( .( 8
اهدف اصلی این پژوهش، بررسی یک اکوسیستم پرشور (

تالاب اینچه برون ) از نظر گوناگونی میکروارگانیسم های ساکن و درک گوشه ای از تنوع زیستی موجود در آن ، شناسایی توانمندی میکروارگانیسم های نمک دوست در تولید متابولیتهای ثانویه و امکان دستیابی به جنس و گونه های جدید برای افزودن به ذخایر ژنتیکی کشور در راستای در اختیار داشتن یک بانک میکربی غنی و بی نیازی از خرید سویه از بانکهای میکربی خارج از کشور بوده است.

مکان انجام این پژوهش تالاب پر شور اینچه برون است که در 25 کیلومتری شمال شهر آق قلا ، در فاصله 3
کیلومتری شرق جاده آق قلا – مرز پل در استان گلستان (

N :37.8.57 و ( E: 54.51

واقع گردیده است .این تالاب حدود 100 هکتار مساحت دارد و ارتفاع عمیق ترین نقطه تالاب از سطح دریای آزاد

54

مجله پژوهشهای سلولی و مولکولی (مجله زیست شناسی ایران) جلد 27، شماره 1، 1393

4 متر است و در طبقه بندی کنوانسیون رامسر در گروه نمونه گیری: در اواخر شهریور 1389 از آب، خاک ، لجن
تالابهای داخلی لب شور و دائمی قرار می گیرد .(3) سطحی وعمقی ، کریستالها ولایه ضخیم نمک، 4 منطقه
مواد وروشها این تالاب نمونه گیری انجام شد. تصویر ماهواره ای تالاب
و نقاط نمونه برداری در شکل 1 نشان داده شده است
(شکل .(1

شکل -1 تصویر ماهواره ای از تالاب اینچه برون و مناطق نمونه برداری

نمونه ها در دمای محیط و در حداقل زمان به آزمایشگاه منتقل شد و pH و شوری آنها اندازهگیری گردید. آنالیز شیمیایی نمک دریاچه جهت سنجش عناصر موجود در محیط زیست طبیعی باکتریهای این دریاچه و به کار گیری آن در طراحی محیط کشت مناسب که امکان جداسازی طیف گستردهتری از باکتریها را فراهم سازد، توسط شرکت بهین خاک آزما صورت گرفت .

خالص سازی و شناسایی سویه ها: از نمونه های منتقل شده به آزمایشگاه برای جدا سازی و کشت باکتریهای نمک دوست نسبی و تحمل کننده نمک، تا رقت 10-6

سری رقت تهیه شد. برای کشت وخالص سازی از محیط جامد Moderate halophiles(12% salt) شامل(گرم در لیتر): 104 : NaCl، 5/4 : MgCl2.6H2O، MgSO4.7H2O

8/3 :، 0/41 : CaCl2.2H2O، 1/66 : KCl، : NaHCO3 0/08، 5 :Yeast Extract، 1 :Glucose، Peptone from
8 :meat و 15 :Agar برای جداسازی نمک دوستهای

نسبی ومحیط جامد Seawater Nutrient Agar (3% salt)

شامل(گرم در لیتر): : 20 : NaCl، 3 : MgCl2.6H2 O،

5 : MgSO4.7H2 O، 0/5 : CaCl2.2H2O، 0/5 : KCl، 1 :Yeast Extract، : Peptone from 2 Meat :Extract

5 :meat و 15 :Agar برای جداسازی تحمل کننده های نمک استفاده گردید(.(2

افتراق جدایههای تحمل کننده نمک و نمک دوست

نسبی: باکتریهای تحمل کننده نمک علاوه بر توانایی رشد در محیط فاقد نمک می توانند غلظتهای بالای نمک را نیز تحمل کرده و در این شرایط نیز رشد کنند. به این دلیل که در ترکیب مواد مورد استفاده در تهیه محیط کشت مثل پپتون، عصاره مخمر و عصاره گوشت نمک وجود دارد و این نمک می تواند نیازمندی به نمک را در باکتریهای نمکدوست پوشش دهد و موجب رشد آنها در محیط فاقد نمک گردد، از محیطی که فقط دارای 5 گرم در لیتر عصاره مخمر بود استفاده شد. این محیط کشت با درصدهای نمک

0، ./5،3 ، 5، 7/5، 10، 15، 20 تهیه شد، pH محیط با استفاده از سود دو نرمال و HCl یک نرمال در 7/5 تنظیم شد و در دمای 121 درجه سانتی گراد و به مدت 15 دقیقه اتوکلاو گردید. نکتهای که در افتراق این باکتریها مدنظر قرار گرفت بهینه رشد بود، زیرا تنها توانایی رشد در محیط فاقد نمک برای اینکه یک جدایه را تحمل کننده نمک در نظر گرفت، کافی نیست . برای انتخاب محیط بهینه از نظر درصد نمک، پس ازگذشت 12 ساعت از

64

16S rRNA

پرایمر1488R با ترادف :

Schaeffer-Fulton
مجله پژوهشهای سلولی و مولکولی (مجله زیست شناسی ایران) جلد 27، شماره 1، 1393

زمان کشت، هر یک از این محیطها مورد مقایسه قرارگرفت و نمکی بهینه انتخاب شد که اولین رشد پایدار باکتری در آن درصد نمک صورت گرفته باشد 2)و.(5 از 400 جدایه خالص شده ، 55 سویه به صورت تصادفی برای تعیین ترادف ژن 16S rRNA ومطالعات تکمیلی انتخاب گشته و پس از استخراج DNA ، انجام PCR و تعیین ترادف نتایج حاصله با توالیهای ثبت شده در بانکهای اطلاعاتی مقایسه گردید.
مطالعات فیلوژنتیک: پس از تهیه توده زیستی،

استخراج DNA باکتریها، طبق روش دستورزی شده پیشنهاد شده توسط Marmur (1994) انجام گرفت .(20)
جهت تأیید استخراج انجام شده، الکتروفورز ژل آگارز

براساس روش (1997) kolmodin صورت گرفت .(19)

برای تکثیر ژن 16S rRNA از پرایمر های عمومی 27F

باترادف:AGA GTT TGA TCM TGG CTC AG ،

CGG TTA CCT TGT TAC

GAC TTC ACC وپرایمر 1492R با ترادف: GGT TAC

CTT GTT ACG ACT T استفاده شد .(25) به دلیل اینکه تمام سویه ها با یک جفت پرایمر تکثیر نشد دو جفت پرایمر 27F -1492R و 27F-1488R به کار گرفته شد. با استفاده از این پرایمرها ژن 16S rRNA با طول حدود 1500 نوکلئوتید تکثیر شد. برای حصول اطمینان از عدم آلودگی مواد مورد استفاده در PCR شاهد منفی با افزودن آب به جای DNA الگو در ویال حاوی مخلوط واکنش به کار رفت. دمای اتصال پرایمرها ، مدت زمان اتصال وسنتز برای هر سویه به طور جداگانه بهینه گردید.

تعیین توالی محصول PCR از طریق شرکت ژن فن آوران انجام شد. ترادفهای به دست آمده با استفاده از نرم افزار

Chromasمرتب شده و با نرم افزار BLAST با توالیهای ثبت شده موجود در پایگاه اطلاعات ژنومی GenBank و Eztaxon مقایسه شد. به این ترتیب نزدیکترین سویهها

با ترادف ژن مشابه با سویههای منتخب PCR

شده تعیین شد. آنالیز فیلوژنتیک باکتریهای منتخب با سویههای نزدیک به آنها با استفاده از نرم افزار Clustal x
(ویرایش دوم) صورت گرفت. درخت فیلوژنی با استفاده از نرم افزار MEGA (ویرایش پنجم) با الگوریتمهای Maximum likelihood و Maximum parsimony رسم گردید .(27) بررسی اعتبار شاخههای درخت با استفاده الگوریتم Bootstrap analysis و با 1000 بار نمونهگیری صورت گرفت .(13)

جدایه های منتخب با آزمایشهای ریخت شناسی و بیوشیمیایی نظیر بررسی شکل کلنی، رنگ آمیزی گرم بر اساس روش (21) Hucker، بررسی شکل میکروسکوپی باکتری، حرکت سلول باکتری به روش لام مرطوب (14)،

رنگ آمیزی اسپور بر اساس روش

(14)، تولید کاتالاز با محلول 3 درصد پراکسید هیدروژن

(16)، تست اکسیداز با استفاده از دیسکهای آماده (15)

احیای نیترات و شرایط بهینه رشد از نظر دما ، میزان نمک

و pH بررسی گردیدند. تولید آنزیمهای هیدرولازی آمیلاز

، پروتئاز ، لیپاز و ژلاتیناز مطابق با دستور ذکر شده در جدول 1 بررسی گردید. بسته به نیاز سویه NaCl به محیطهای آنزیمی افزوده شد و پس از تلقیح همگی به مدت 2 هفته در دمای 35 درجه سانتی گراد گرما گذاری شدند. (جدول (1

نتایج

جداسازی و شناسایی: با توجه به نتایج حاصل از آنالیز آب، به دلیل بالا بودن میزان یونهای Na+ و-Cl ، تالاب اینچه برون در گروه مناطق پرشور تالازوهالین با منشاء دریایی قرارمی گیرد.

محل 4 با 5105 cfu باکتری بیشترین بار میکربی را داشت وکمترین تعداد جدایه متعلق به نمونه برداری از منطقه 1
بود . در مجموع 400 جدایه خالص سازی گردید که بیشترین جداسازی از محیط MH با 12 درصد نمک و pH

74

مجله پژوهشهای سلولی و مولکولی (مجله زیست شناسی ایران) جلد 27، شماره 1، 1393

5/5 انجام گرفت. با توجه به نتایج ذکر شده در جدول 2، بیشتر جدایه ها باسیلهای گرم مثبت بودند (جدول .(2

آنزیم

آمیلاز

پروتئاز

لیپاز

ژلاتیناز

شکل -2 نمودار فراوانی و تنوع جنسهای جدا شده از پژوهش

جدول -1 ترکیب محیطهای کشت بررسی تولید آنزیم

محیط تولید آنزیم(گرم در لیتر ) روش تشخیص
Beef extract : 3 Soluble starch : 10 , افزودن لوگل ( یدید پتاسیم) بر روی محل رشد
Agar : 15
باکتری و ایجاد هاله شفاف پاسخ مثبت در نظر
پس از آماده سازی pH محیط بر روی 7/5 تنظیم شده و در دمای 115 درجه
گرفته شد.
سانتی گراد برای مدت 10 دقیقه اتوکلاو شد(.(12

Meat extracts : 3 , Peptone : 5 , Skim milk : 20
Agar : 15 وجود هاله شفاف در اطراف کلونیها نشانه
پودر Skim Milk در نیمی از حجم آب محیط حل شده و در دمای 110 درجه
هیدرولیز پروتئین کازئین بوده و به عنوان پاسخ
سانتی گراد به مدت 10 دقیقه اتوکلاو شد و بعد از آن به محیط پایه آگاردار که
مثبت در نظر گرفته شد
پس از آماده سازی بر روی 7/5 pH تنظیم شده در دمای 121 درجه سانتی

گراد، 15 دقیقه اتوکلاو شده است، اضافه شد(.(24
CaCl2.H2O: 0/1 , Peptone :10, Tween 80: 10
15 Agar : ایجاد نواحی رسوب اطراف کلنی ها، به صورت
توئین موجود در این محیط بعد از تهیه در دمای 115 درجه سانتی گراد به مدت دانه های سفید همراه با هاله کدر نشان دهنده
20 دقیقه اتوکلاو شد. محیط پایه نیز پس از آماده سازی بر روی 7/5 pH تنظیم تولید آنزیم لیپاز توسط باکتری است.
شده و به صورت جداگانه در دمای121 درجه سانتی گراد به مدت 15 دقیقه
اتوکلاو شد. دو محیط پس از اتوکلاو به هم اضافه شد(.(23
Meat extracts : 3 , Peptone : 5 , Gelatin : 120 محیطهای رشد کرده را به همراه یک نمونه منفی
محیط ابتدا آب تا دمای نزدیک جوش گرم شده و نمک و محیط کشت به آرامی
به این ترکیب اضافه شد. pH محیط آماده شده بر روی میزان 7/5 تنظیم شده و در دمای 4 درجه سانتی گراد قرار داده پس از
برای 15 دقیقه در دمای 121 درجه سانتی گراد اتوکلاو شد. محیط آماده شده به 20 دقیقه در صورت مایع بودن محیط نتیجه
روش Stab کشت داده شد. (24) تست مثبت گزارش شد.

84

مجله پژوهشهای سلولی و مولکولی (مجله زیست شناسی ایران) جلد 27، شماره 1، 1393
جدول – 2 مختصات مناطق نمونه برداری وتعداد جدایه های خالص سازی شده
به تفکیک محل و نتایج لام گرم
منطقه نمونه مختصات جغرافیایی میانگین شوری میانگین pH باسیل گرم باسیل گرم کوکوس گرم جمع
برداری منفی مثبت مثبت

بستر نمکی 17 22 2 41
محل 1 N :37.13.438 E: 26.8 4.2 24 35 6 65
54.30.224
محل 2 N: 37.13.932 E: 28.7 5.2 40 50 5 95
54.30.081
محل 3 N :37.13.829 28.4 5.2 39 37 2 78
E:54.30 .307

محل 4 N: 37.13.517 E: 23.3 6.45 64 50 7 121
54.30.657

جمع کل 184 194 22 400
بررسی فیلوژنی: در 55 سویه ترادف ژن 16S rRNA بدون انجام هیبریداسیون DNA-DNA با گونههای نزدیک،
مورد بررسی قرار گرفت که با توجه به نتایج در 15 جنس می توانند به عنوان گونههای جدید مطرح شوند .(26) در
قرار گرفتند. ، از این تعداد جنسهای Micrococcus و این مطالعه براساس شباهتهای فنوتیپی در میان سویه های
Rhodococcus فقط از محل 1 جدا شده اند .جنسهای تعیین ترادف شده ، در نهایت 22 سویه نمک دوست نسبی
Kocuria و Dietzia فقط محل 3 و 4 و Desmospora و و33 سویه تحمل کننده نمک جدا گردید که در نمک
Chromohalobacter فقط از محل 4 جدا شدند. تنوع دوستهای نسبی بیشترین فراوانی متعلق به جنسهای
وفراوانی جنسهای جداشده در شکل 2 آورده شده است Marinobacter و Halomonas بود وعمده ترین تحمل
(شکل .(2 کنند ه های نمک به جنسهای Oceanobacillus , Dietzia,
از 55 سویه تعیین ترادف شده ، 13 سویه که متعلق به Bacillus و Kocuria قرابت داشتند .سویه های تعیین
ترادف شده از نظر سیستماتیک در 3 رده 40) درصد
گونه های مختلف از 5 جنس , Virgibacillus Bacillus
Firmicutes(، 24) درصد)Actinobacteria و رده 36)
,Dietzia Oceanobacillus و Halomonase بودند ،
درصد)-Proteobacteria قرار گرفتند . اغلب سویهها
شباهتی 100 درصد در ترادف 16S rRNA داشتند، که
متعلق به رده Firmicutes بودند که درختهای فیلوژنی رسم
آنها را از نظر ارائه به بانک میکربی به عنوان
شده به روشMaximum likelihood برای هر رده و
میکروارگانیسم بومی شناسایی شده حائز اهمیت می سازد.
محل قرار گرفتن سویه های بررسی شده در آن، در
همچنین در 13 سویه که متعلق به 3 جنس Bacillus,
شکلهای3، 4 و5 نشان داده شده است (شکلهای3، 4 و.(5

 

اشتراک‌گذاری:

 

 

 

 

 

برای دریافت پروژه اینجا کلیک کنید

کلمات کلیدی :

مقاله بررسی تاثیر تماس پوستی مادر و نوزاد بردلبستگی مادران تحت p

 

برای دریافت پروژه اینجا کلیک کنید

مقاله بررسی تاثیر تماس پوستی مادر و نوزاد بردلبستگی مادران تحت pdf دارای 8 صفحه می باشد و دارای تنظیمات در microsoft word می باشد و آماده پرینت یا چاپ است

فایل ورد مقاله بررسی تاثیر تماس پوستی مادر و نوزاد بردلبستگی مادران تحت pdf کاملا فرمت بندی و تنظیم شده در استاندارد دانشگاه و مراکز دولتی می باشد.

این پروژه توسط مرکز مرکز پروژه های دانشجویی آماده و تنظیم شده است

توجه : در صورت  مشاهده  بهم ریختگی احتمالی در متون زیر ،دلیل ان کپی کردن این مطالب از داخل فایل ورد می باشد و در فایل اصلی مقاله بررسی تاثیر تماس پوستی مادر و نوزاد بردلبستگی مادران تحت pdf ،به هیچ وجه بهم ریختگی وجود ندارد


بخشی از متن مقاله بررسی تاثیر تماس پوستی مادر و نوزاد بردلبستگی مادران تحت pdf :

خلاصه مقدمه: سلامت روانی هر فرد بستگی به کیفیت ارتباطات فردی دارد و اولین ارتباط های بین فردی از رابطه مادر و نوزاد آغاز

می گردد. این ارتباط تعامل بین مادر و نوزاد را تسهیل کرده و سبب افزایش دلبستگی مادر به نوزاد می گردد از جمله روش های افزایش دلبستگی تماس پوستی مادر و نوزاد است. لذا مطالعه ای با هدف تأثیر تماس پوستی مادر و نوزاد بر دلبستگی مادران انجام شد .

روش کار : پژوهش حاضر به روش کار آزمایی بالینی برروی79خانم سزارین شده صورت گرفت.انتخاب اولیه بیمارستان های موردمطالعه جهت تعیین دو گروه تجربی 40) نفر ) و شاهد ( 39 نفر ) به طور تصادفی انجام شد و هر 5 روز یک بار جای دو گروه عوض می شد.

در گروه تجربی تماس پوستی روزانه حداقل به مدت 20-30 دقیقه انجام می گرفت. جهت تعیین رفتارهای دلبستگی و اضطراب مربوط به کودک از ابزار دلبستگی مادری استفاده گردید. دلبستگی در روزهای اول ، سوم و دهم پس از سزارین بررسی شد. تجزیه و تحلیل آماری با استفاده از آزمون های t و رگرسیون صورت گرفت.

نتایج:نتایج نشان داد که بین دلبستگی مادری روز سوم و دهم دوگروه اختلاف معنی داری وجود دارد.همچنین اختلاف میانگین دلبستگیمادری دوگروه در روزهای اول- دهم و اول – سوم اختلاف آماری معنی داری دارد. نتایج آماری آزمون رگرسیون نشان داد که تنها تماس پوستی مادر و نوزاد و دلبستگی مادری روز اول بر دلبستگی مادری روز سوم موثر بودند .

بحث: بر اساس نتایج پژوهش تماس پوستی مادر و نوزاد روشی موثر در افزایش دلبستگی و کاهش اضطراب مربوط به کودک بود.لذاپیشنهاد می گردد که تماس پوستی مادر و نوزاد به عنوان یکی از راهکارهای سلامت روانی مادر و نوزاد به کار رود.

واژه های کلیدی : تماس پوستی مادر و نوزاد ، دلبستگی ، اضطراب ، سزارین

مقدمه

دلبستگی رابطه ای گرم صمیمانه و پایا بین مادر و کودک است که برای هر دو رضایت بخش بوده و تعامل مادر و نوزاد را تسهیل می کند. پیوند1 همان رابطه عاطفی مادر و نوزاد است که یک طرفه بوده و بلافاصله بعد از زایمان شکل می گیرد.2

*آدرس مؤلف مسئول: اصفهان- خیابان بزرگمهر- مبارزان کوی ارم- بیژن-

پلاک. 4 تلفن تماس: 0331-2641275

Email: farahnaz-n2005@hotmail.com

تاریخ وصول: 84/12/25 تاریخ تایید: 86/6/22

1 Bonding2. Klas and kennel

دلبستگی الگویی است که همواره با انسان همراه است منتهی رو به سوی تغییر و تحول دارد. این ارتباط عاطفی که در طول بارداری شکل می گیرد، بعد از زایمان با تماس چشمی، بویایی، و لمسی مادر و نوزاد ارتقا می یابد .(2) این نوع تماس را که می توان در قالب تماس پوستی مادر و نوازد مشاهده نمود، سبب برقرای پیوند تعاملی مادر و نوزاد بعد از تولد می گردد. کیفیت رابطه والد و فرزند بر سلامت روحی، اجتماعی و عاطفی هر فرد تاثیر به سزایی دارد و ارتباط اولیه مادر و کودک تاثیر طولانی مدت بر رشد و تکامل نوزاد دارد.

مری آنیثورث1 معتقد بود که تعامل مادر و کودک تاثیر عمیقی بر رفتار و کاهش اضطراب کودک دارد و اختلال در روابط مادر و نوزاد عامل اختلال روانی فرزند در سال های آتی است .(3) اختلال دلبستگی، نتیجه جدایی از مادر و یا کمبود مراقبت یا تعامل با مادر می باشد که عوارض آن شامل نارسایی رشد2، کوتولگی روانی اجتماعی3، اختلال اضطراب جدایی4، اختلال شخصیتی اجتناب گر، بزه کاری، مشکلات درسی یا بهره هوشی مرزی5 است.

تماس پوستی مادر و نوزاد برای اولین بار توسط ری و مارتینز6، در بوگوتای کلمبیا طراحی شد. این مراقبت نوعی مداخله است که به تکامل عصبی و رفتاری نوزاد کمک کرده و با ایجاد پیوند بین مادر و نوزاد سبب افزایش مهارت مراقبت از نوازد و اعتماد به نفس او می شود . (4 ) از آن جا که این روش تسهیل کننده تغذیه با شیر مادر است سبب بهبود بقاء نوزاد می گردد و روشی بهینه جهت تطابق نوزاد با محیط خارج از رحم است و به ویژه نوزاد را در برابر هیپوترمی7 و

هیپوگلسیمی8 محافظت می کند .(4) لمس نوزاد در تماس پوستی مادر و نوزاد سبب می شود که الگوی دلبستگی بسیار قوی تری حاصل شود و معمولاً باعث افزایش قابل توجه مراقبت مادر از طفل می گردد .(5)

پرودرومیدز9 در مطالعه ای با هدف مقایسه رفتار مادرانی که تماس فوری و مداوم با نوزادانشان داشتند با خانم هایی که تنها در زمان شیر دهی در ارتباط با کودکانشان بودند، نتیجه گرفت که رفتارهای دلبستگی از جمله نگاه کردن، صحبت کردن و لمس نوزاد در گروهی که تماس فوری با نوزادشان داشتند، بیشتر

1 Anisworth2. FailourTo Thrive3. Psychosocial dwarfism

4 Separation A مقاله بررسی تاثیر تماس پوستی مادر و نوزاد بردلبستگی مادران تحت pdf iety Disroder5 . Border line intelligence6. Rey & Martinez7. Hypothermia8. Hypoglycemia9. Prodromidis

از گروه شاهد بود .(6) کوری10 نتیجه تحقیق خود را به این شرح بیان کرد که تماس پوست با پوست مادر و نوزاد طی اولین ساعت پس از زایمان تاثیری بر رفتارهای دلبستگی مادر

36 ساعت و 3 ماه بعد از زایمان نداشت .(7) در مطالعه ای نیز ارتباط معنی داری بین پیوند والد و نوزاد با مراقبت کانگرویی وجود نداشت .(8)

نظر به آن که نتایج متفاوتی در ارتباط تاثیر تماس پوستی بردلبستگی مادر موجود است، مطالعه ای با هدف تعیین تاثیر تماس پوستی مادر و نوزاد بر دلبستگی مادران سزارین شده بیمارستان های بهشتی و شریعتی اصفهان انجام شد. بدان امید که نتایج آن راه گشایی جهت توجه به ابعاد روانی مادر و نوزاد و سلامت آن دو در سطح وسیع گردد.

روش کار

پژوهش فوق به روش کارآزمایی بالینی بر روی 79 خانم باسواد 18 -35 سال که حاملگی تک قلو، خواسته و ترم داشته و جهت سزارین انتخابی مراجعه کرده بود، انجام شد. معیارهای ورود به نمونه شامل: سلامت مادر، سلامت نوزاد، مادر طی

2 ساعت اول بچه خود را شیرداده باشد و فقدان تنش و اختلافات شدید خانوادگی بود. انتخاب واحدهای پژوهش به صورت مبتنی بر هدف انجام گرفت، به این شکل که از بین مراجعین سزارین انتخابی به بیمارستان های بهشتی و شریعتی شهر اصفهان از تیر تا آبان سال 80 ، واجدین مشخصات واحد پژوهش انتخاب شدند و جهت جلوگیری از تماس دو گروه شاهد و تجربی و یکسان نمودن محیط های مطالعه به مدت 5 روز در یک بیمارستان، اطلاعات گروه شاهد و 5 روز بعد اطلاعات مربوط به گروه تجربی جمع آوری گردید و هر 5 روز یک بار جای دو گروه در دو بیمارستان عوض می شد. انتخاب اولیه بیمارستان ها جهت تعیین دو گروه شاهد و تجربی به طور تصادفی انجام شد. در مطالعه فوق متغیر مستقل تماس پوستی مادر و نوزاد بود که روزانه حداقل به مدت 20-30 دقیقه انجام می شد.

10 Curry

26

منظور از تماس مادر و نوزاد حالتی است که نوزاد در حالی که تنها پوشش تناسلی دارد بر روی سینه برهنه مادر قرار گرفته و به وسیله پوششی که روی مادر قرار داشت گرم می شد.

متغییر وابسته دلبستگی مادری بود که با استفاده از ابزار دلبستگی مادر بررسی می شد. متغییرهای تحت نظر شامل:
اطلاعات فردی، کیفیت رابطه با همسر، شدت درد و اطلاعات مربوط به بارداری و زایمان و مادر و نوزاد بود.

ابزار مورد استفاده شامل پرسش نامه اطلاعات فردی، بارداری و زایمان و مادر و نوزاد بعد از زایمان بود. مقیاس دلبستگی مادری که از 15 سوال تشکیل شده و شامل دو زیر گروه دلبستگی اساسی و اضطراب مربوط به کودک است که در روزهای اول ، سوم و دهم ارزیابی شد . مقیاس های کیفیت رابطه با همسر، دلبستگی مادری و دیداری درد نیز طبق مقیاس لیکرت طبقه بندی شده اند.

روایی فرم انتخاب نمونه، مشاهده، مصاحبه و فرم ثبت تماس روزانه به روش روایی محتوا تعیین گردید. روایی مقیاس کیفیت رابطه با همسر نیز توسط خدا دوستان گزارش شده است .(9) مقیاس دلبستگی مادری نیز استاندارد بوده و از روایی لازم برخوردار است و برای اولین بار توسط ناگاتا1 و

همکاران مورد استفاده قرار گرفت .(10)

پایایی فرم های انتخاب نمونه (r=0/92) مصاحبه (r=0/93) و

مشاهده (r=0/90) با استفاده از روش پایایی هم ارز تایید گردید.

مقیاس دیداری درد استاندارد بوده و از پایایی لازم برخوردار است. پایایی مقیاس کیفیت رابطه با همسر (=0/864) و دو زیر گروه دلبستگی اساسی (=0/7) و اضطراب مربوط به کودک

(=0/7) به روش ضریب کرانباخ محاسبه شد. جهت تجزیه و تحلیل آماری نیز از روش های t دانشجویی ، t زوجی و مدل های خطی عمومی استفاده شد.

نتایج

میانگین سن مادران گروه تجربی ( 24/2±4/4 ) و گروه شاهد (25/1±4/4) بود که اختلاف معنی داری نداشتند.

دو گروه از نظر خصوصیات دموگرافیک، وجود فرد حامی و کیفیت رابطه با همسر همگن بودند. علت سزارین اکثر خانم ها
(% 57) سزارین قبلی بود و برنامه شیردهی نوزادان دوگروه طبق تقاضای نوزاد بود. طول مدت شیردهی گروه مورد بیشتر از گروه شاهد بود، اما اختلاف آماری معنی داری نداشتند.

شدت درد افراد مورد مطالعه در روز سوم اختلاف آماری معنی داری نداشت. اما این اختلاف در روزهای چهارم

(p=0/02) و دهم (p=0/03) معنی دار بود جدول شماره(.(1

 

برای دریافت پروژه اینجا کلیک کنید

کلمات کلیدی :
<   <<   66   67   68   69   70   >>   >